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MyGo Pro PCR (定量聚合酶链式反应)仪器用户手册的使用指南
发布时间:2025-06-17 11:46:28 | 浏览量:5

MyGo Pro PCR 仪器用户手册的使用指南

1. MyGo Pro PCR 仪器的原理、功能与用途

原理

MyGo Pro 是一款基于聚合酶链式反应(PCR)技术的实时定量 PCR(qPCR)仪器,通过热循环实现 DNA 或 RNA 的扩增。其核心技术是“全光谱光学”(Full Spectrum Optics),利用高强度 LED(500 nm 激发)和 CMOS 相机(510-750 nm 检测),从每个反应管并行收集 120 个光学通道的荧光数据,无需移动部件,确保多重 PCR 的可靠性。此外,MyGo Pro 支持高分辨率融解曲线(HRM)分析,能够区分所有类型的单核苷酸多态性(SNP),包括 Class 4 SNP。

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功能

MyGo Pro 提供以下关键功能:

  • 高精度和灵敏度:单拷贝检测,9 日志动态范围,1.1 倍区分精度。

  • 多重 PCR:支持至少 7 个目标同时分析,每个目标使用不同荧光标签。

  • 快速热循环:加热速度 5°C/秒,冷却速度 4°C/秒,45 个循环约 33 分钟,总运行时间少于 40 分钟。

  • HRM 分析:结合热控制、光学数据质量和 HRM 数据分析,高效区分遗传变异。

  • 自动化分析:软件支持绝对和相对定量、融解曲线分析、端点基因分型和 HRM。

  • 技术规格

    • 热均匀性:±0.1°C

    • 热精度:±0.25°C

    • 温度范围:37-99°C

    • 光学通道:4 个(多重),支持 SYBR Green I、FAM、ROX 等 22 种预校准染料

    • 支持的检测格式:TaqMan、Molecular Beacons、SimpleProbes®、Intercalators、HRM

以下表格总结了主要功能:

功能类别详情
检测灵敏度单拷贝检测,9 日志动态范围,1.1 倍区分精度
热循环速度加热 5°C/秒,冷却 4°C/秒,45 循环约 33 分钟
光学系统120 个光学通道,510-750 nm 检测,CMOS 相机
支持染料SYBR Green I、FAM、ROX 等 22 种
分析模块绝对/相对定量、融解曲线、HRM 等

用途

MyGo Pro 广泛应用于:

  • 基因表达分析:检测 10% 的转录本浓度差异。

  • 病原体检测:量化病原体水平。

  • 遗传变异分析:通过 HRM 识别 SNP。

  • 实验室研究:适用于生命科学、食品物种鉴定、病毒检测等。

  • 高通量应用:单台计算机可控制 200 台 MyGo Pro 或 400 台 MyGo Mini。

2. MyGo Pro PCR 仪器的安装与设置流程

安装步骤

  1. 检查组件

    • 确认包装包含:MyGo Pro qPCR 系统、用户手册、电源适配器和电缆、以太网电缆、USB 驱动器。

    • 检查是否有损坏或缺失部件。

  2. 连接电源

    • 使用 24V DC 电源适配器,3 针 IEC 连接器。

    • 仪器无开关电源,可选购开关电缆。

  3. 选择连接方式

    • USB:使用 MyGo 品牌 USB 驱动器,包含软件和手册。第三方 USB 需通过软件速度测试。

    • 以太网:连接到 LAN 或直接连接计算机。

  4. 软件安装

    • 从 USB 驱动器或 网上 下载 MyGo 软件。

    • 兼容 Windows、Mac OS X 和 Linux,无许可证限制。

  5. 环境设置

    • 放置在稳固、干燥的实验室台面,远离气流。

    • 确保通风口畅通,避免覆盖。

    • 加热盖在实验中加热至 105°C,实验后勿触碰。

设置注意事项

  • 通风:勿在加热盖上放置物品或液体,以免影响性能。

  • 环境条件:参考用户手册中的操作、运输和存储条件。

  • 运输:使用飞行箱或原包装,放置聚苯乙烯圆圈保护井。

以下表格总结了安装步骤:

步骤详情
检查组件确认仪器、电源适配器、电缆、USB 驱动器等齐全
连接电源使用 24V DC 电源,3 针 IEC 连接器
连接方式USB 或以太网,USB 需通过速度测试
软件安装从 网上下载,兼容多平台
环境设置稳固台面,远离气流,确保通风

3. MyGo Pro PCR 仪器的连接与运行实验的方法

连接方法

  • USB 连接

    • 插入 MyGo 品牌 USB 驱动器,确保包含实验文件。

    • 使用 USB 延长电缆(MyGo Mini 适用)。

  • 以太网连接

    • 使用以太网电缆连接到 LAN 或计算机。

    • 确保网络设置正确,避免数据丢失。

运行实验步骤

  1. 准备样本

    • 使用 0.1 ml 管或 8 管条,最多 32 个样本,反应体积 10-100 μl。

    • 单 8 管条运行时,需在第 1 和第 4 行加载空管条。

  2. 设置实验

    • 在 MyGo 软件中创建模板:点击“打开”,选择“模板”文件类型。

    • 设置样本和目标信息,可在实验运行中修改。

    • 配置温度循环参数(如保持时间、循环次数)。

  3. 启动实验

    • 通过 USB 或 LAN 启动,实验开始后无法更改设置。

    • 盖子自动锁定,实验结束后解锁(显示青色)。

  4. 监控实验

    • 软件显示实时温度和荧光数据。

    • 背景校正:6 个循环后自动校正(基于第 4、5、6 循环平均值)。

  5. 数据保存

    • 保存到 PC 或 USB 驱动器,LAN 连接需确保网络稳定。

注意事项

  • 耗材:使用气密性好、光学透明的耗材。

  • 染料:预校准 22 种染料(如 FAM、ROX),非预校准染料需生成染料文件。

  • 数据管理:使用 USB 驱动器减少网络不稳定导致的数据丢失。

以下表格总结了运行实验步骤:

步骤详情
样本准备0.1 ml 管或 8 管条,10-100 μl 反应体积
实验设置创建模板,设置样本和目标,配置温度循环
启动实验通过 USB 或 LAN 启动,盖子自动锁定
数据监控实时查看温度和荧光数据,自动背景校正
数据保存保存到 PC 或 USB,LAN 需稳定网络

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4. MyGo Pro PCR 仪器的使用提示与技巧

使用技巧

  • 耗材选择

    • 使用 MyGo 推荐耗材,确保密封性和热传导效率。

    • 第三方耗材需气密、光学透明、生物相容、无 DNA/RNA 酶。

  • 样本处理

    • 确保管盖密封良好,避免泄漏。

    • 佩戴手套操作,实验后立即处理 PCR 管,防止污染。

  • 实验优化

    • 使用非荧光淬灭剂(如 BHQ)以获得最佳荧光信号。

    • 荧光淬灭剂(如 TAMRA)需在样本设置中添加以启用光谱去卷积。

  • 软件使用

    • 使用模板快速启动实验。

    • 定期检查 获取软件更新。

维护建议

  • 清洁

    • 仪器脏污或污染时,参考去污指南。

    • 送修前确保清洁。

  • 校准

    • 无需定期光学或热校准,损坏时联系技术支持。

  • 运输

    • 减少移动,使用聚苯乙烯圆圈保护井,使用飞行箱或原包装。

以下表格总结了使用提示:

类别提示
耗材选择使用 MyGo 推荐耗材,确保密封和光学透明
样本处理密封管盖,佩戴手套,立即处理用过的 PCR 管
实验优化使用非荧光淬灭剂,添加荧光淬灭剂到样本设置
维护定期清洁,无需定期校准,安全运输

5. MyGo Pro PCR 仪器的常见故障解决方法

常见问题及解决方案

  • 仪器不开机

    • 检查电源电缆是否牢固连接到仪器和插座。

  • 实验无法启动

    • 确保管子正确加载,MyGo Mini 盖子牢固关闭。

    • 检查网络设置(LAN 运行)。

  • 网络连接失败

    • 确保以太网电缆插入时听到“咔嗒”声,轻轻拉动确认不松动。

  • 实验无法完成

    • 不要在 LAN 运行时关闭软件或断开网络。

  • USB 运行问题

    • 确保 USB 驱动器牢固连接,包含实验文件。

    • 实验完成前勿移除 USB(MyGo Pro 显示青色)。

  • 仪器闪烁红色

    • 开机,若持续闪烁,联系技术支持。

其他注意事项

  • 数据丢失:LAN 不稳定时使用 USB 驱动器。

  • 污染:参考去污指南清洁仪器。

以下表格总结了故障排除方法:

问题解决方案
仪器不开机检查电源电缆连接
实验无法启动确认管子加载,检查网络设置
网络连接失败确保以太网电缆牢固连接
USB 运行问题确认 USB 驱动器连接,勿提前移除
闪烁红色开机,持续闪烁联系技术支持

总结

MyGo Pro PCR 仪器是一款高效、可靠的 qPCR 系统,适用于多种分子生物学应用。其全光谱光学和快速热循环技术确保高精度和多重分析能力。安装和设置简单,运行实验通过用户友好的软件完成。遵循使用提示和维护建议可确保最佳性能,常见故障可通过检查连接和设置解决。

 
 
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